2
1
3
Literature & Humanities
http://daneshafarand.ir
1
admin
9
10
8
7
14
8888
13
en
jalali
1395
5
1
gregorian
2016
8
1
1
نشريه الکترونيک پروتکلهای تحقيقاتی زيستپزشکی
online
1
fulltext
fa
تخلیص و تغلیظ DNA از محلولهای آبی
Purification and Concentration of DNA from Aqueous Solutions
انسانی
Humanities
ويرايش فارسی
Persian Editing
<p dir="RTL">این بخش روش­های اصلی برای دست­ورزی محلول­های تک­زنجیره­ای یا دو­زنجیره­ای <span dir="LTR">DNA</span> در طی مراحل تخلیص و تغلیظ را ارایه می­کند. این تکنیک­ها وقتی که پروتئین­ها یا ملکول­های حل­شونده باید از محلول­های آبی برداشته­ شوند یا وقتی محلول­های <span dir="LTR">DNA</span> برای سهولت در کار نیاز به تغلیظ دارند، قابل استفاده هستند. روش اصلی که از استخراج فنولی و رسوب­دادن با اتانول استفاده می­کند، برای تخلیص <span dir="LTR">DNA</span> در حجم­های کوچک (4/0<span dir="LTR"><</span>) و در غلظت­های<span dir="LTR">mg/ml </span>1≥ مناسب است. همان­طور که در پروتکل جایگزین 1 آمده، ایزوپروپانول نیز ممکن است برای ته­نشینی <span dir="LTR">DNA</span> استفاده شود. سه پروتکل مکمل روش­هایی را برای استفاده از بافر فنول (پروتکل 2 را ملاحظه کنید) و استخراج حلال­های آلی باقیمانده با اتر (پروتکل مکمل 3 را مشاهده کنید) ترسیم می­کنند. روش دیگر تخلیص اسیدنوکلئیک با استفاده از ستونهای<span dir="LTR">spin </span> با غشای سیلیکایی است که به صورت تجاری در دسترس هستند و در پروتکل 2 آمده است. همچنین می­توان از پروتکل­های جایگزین برای تخلیص <span dir="LTR">RNA</span> استفاده کرد.</p>
<p><span dir="RTL"> دو پروتکل جایگزین پایانی، اصلاحاتی را برای پروتکل اصلی فراهم می­کند که برای تغلیظ </span>RNA<span dir="RTL"> و استخراج و ته­نشینی </span>DNA<span dir="RTL"> از حجم<sub>­</sub>های بالاتر و محلول­های رقیق (پروتکل جایگزین 3) و همچنین برای برداشتن الیگونوکلئوتید­ها با وزن مولکولی پایین و تری­فسفات­ها (پروتکل</span> <span dir="RTL">جایگزین 4) استفاده می­شود.</span></p>
<p>This unit presents basic procedures for manipulating solutions of single‐ or double‐stranded DNA through purification and concentration steps. These techniques are useful when proteins or solute molecules need to be removed from aqueous solutions, or when DNA solutions need to be concentrated. The , using phenol extraction and ethanol (or isopropanol) precipitation, is appropriate for purification of DNA from small volumes (<0.4 ml) at concentrations lower than 1 mg/ml. Three support protocols outline methods to buffer the phenol used in extractions, concentrate DNA using butanol, and extract residual organic solvents with ether. An alternative to these methods is nucleic acid purification using glass beads and this is also presented. These protocols may also be used for purifying RNA. The final two alternate protocols are used for concentrating RNA and extracting and precipitating DNA from larger volumes and from dilute solutions, and for removing low‐molecular‐weight oligonucleotides and triphosphates.</p>
0
0
http://daneshafarand.ir/browse.php?a_code=A-10-1-1&slc_lang=fa&sid=1